Técnica de Exudado Faríngeo
Tipo
de Siembra
°Siembra
por estría cruzada en 5 campos con picadura
°Recuerda
solo se coloca muestra en la primera asada después se esparse de donde la
primera a la segunda y haci sucesivamente
Esteriliza
entre campo y campo y entre picadura y picadura
Microorganismo
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Aspecto
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Pequeñas
a medianas, opacas convexas no hemolíticos amplia variedad de pigmentos
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Micrococcus
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Medianas
a Grandes, lisas de aspecto uniforme ligeramente elevadas con pigmentos
amarillo cremoso y bateemos
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Staphylococcus
aureus
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Pequeñas,
medianas colonias traslucidas blanco grisáceas la mayoría de las colonias no hemolíticas
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s.saprophytos
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Colonias
grandes de bordes uniformes superficie muy brillante lisas u opacas por lo
general son blancos pero pueden ser amarillas o anaranjadas
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Staphylococcus haemoliticos
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Medianas
lisas con consistencia montañosa
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S.Hominis
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Medianas
a grandes lisas con consistencia mantecosa pueden no tener pigmento o
presentar un color amarillo cremoso o anaranjado
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Colonias en
Sal & Manitol
°Staphylococcus
Aureus produce colonias redondas con un halo Amarillo, fermentado el manitol
(cambio de coloración)
Pruebas Bioquímicas
°Coagulasa
(Staphylococcus Aureus)+
°Catalasa
(Estafilococo de estreptococo)+
°Oxidasa
(Neisseria & Pseudomonas)+
Prueba PYR
°Determina
la presencia de la enama L Pirroglutamila minopeptidasa que hidroliza el
sustrato I-Pirrolidonil B Naftilamina (PYR), Se determina como el Reactivo N, N
Metil aminoacianmaldehido
Primer Día
-Elaboración
de Medios
-Seis
Tubos con 0.5 ml de Caldo Nutritivo, 12 Tubos MRVP
Segundo Día
-Elaborar
la Tinción Directa
-Siembra
en Agar Sangre por la Técnica de Estría Cruzada por 5 Campos por picadura. En
Sal y manitol por medio de la técnica de estría cruzada en 3 Campos. En Agar
Chocolate por medio de la técnica de estría cruzada en 5 campos.
-Incubar todas las cajas a
37° por espacio de 24 hrs
Tercer Día.
-Observar
Colonias
-Identificar
las colonias patógenas (alfa o Beta Hemolíticas), Identificación de colonias patógenas
en agar sal y manitol y resembrar en el tubo con 0.5 ml de solución salina. De
la colonia más representativa.
-Tinción
Gram de la colonia seleccionada, previamente disuelta en S.S
-Sembrar
el caldo nutritivo, el MRVP, con la colonia seleccionada por agitación, TSI por
estría simple.
-Sembrar
el Antibiograma en el medio Muller Hinton con el hisopo dejar reposar 5 minutos
y después colocar el sensidisco de acuerdo al resultado de la tinción gran (+).
-Incubar
24 hrs a 37°C
Cuarto Día
-Lectura
del antibiograma. Medir los mm de los halos de inhibición de cada uno de los antibióticos
-Lectura
e interpretación de pruebas bioquímicas
-Coagulasa:
colocar 0.5 ml de plasma fresco al tubo con caldo nutritivo, incubarlo por
espacio de 30 min hasta completar 4 hrs
-Catalasa:
Obtener una colonia del medio TSI y colocarla en un portaobjetos, agregar H2O2
Observar presencia de Burbujas.
-Oxidasa
.Colocar una colonia del medio TSI y colocarla en un papel filtro , añadir
reactivo Kovacs y observar coloración naranja
-VP:
Agregar 0.5 ml de Hidróxido de sodio dejar reposar 20 minutos si aparee color
Rojo es positiva
-TSI:
Observar cambio de coloración en la base del tubo Glucosa.
*Anotar
Resultados
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