martes, 8 de diciembre de 2015

Técnica de Exudado Faríngeo
Tipo de Siembra
°Siembra por estría cruzada en 5 campos con picadura
°Recuerda solo se coloca muestra en la primera asada después se esparse de donde la primera a la segunda y haci sucesivamente
Esteriliza entre campo y campo y entre picadura y picadura

Microorganismo
Aspecto

Pequeñas a medianas, opacas convexas no hemolíticos amplia variedad de pigmentos
Micrococcus
Medianas a Grandes, lisas de aspecto uniforme ligeramente elevadas con pigmentos amarillo cremoso y bateemos
Staphylococcus aureus
Pequeñas, medianas colonias traslucidas blanco grisáceas la mayoría de las colonias no hemolíticas
s.saprophytos
Colonias grandes de bordes uniformes superficie muy brillante lisas u opacas por lo general son blancos pero pueden ser amarillas o anaranjadas
Staphylococcus haemoliticos
Medianas lisas con consistencia montañosa
S.Hominis
Medianas a grandes lisas con consistencia mantecosa pueden no tener pigmento o presentar un color amarillo cremoso o anaranjado
Colonias en Sal & Manitol
°Staphylococcus Aureus produce colonias redondas con un halo Amarillo, fermentado el manitol (cambio de coloración)
Pruebas Bioquímicas
°Coagulasa (Staphylococcus Aureus)+
°Catalasa (Estafilococo de estreptococo)+
°Oxidasa (Neisseria & Pseudomonas)+
Prueba PYR
°Determina la presencia de la enama L Pirroglutamila minopeptidasa que hidroliza el sustrato I-Pirrolidonil B Naftilamina (PYR), Se determina como el Reactivo N, N Metil aminoacianmaldehido
°Positivo con un color Brillante De Hasta 5 Minutos
Primer Día
-Elaboración de Medios
-Seis Tubos con 0.5 ml de Caldo Nutritivo, 12 Tubos MRVP

Segundo Día

-Elaborar la Tinción Directa






-Siembra en Agar Sangre por la Técnica de Estría Cruzada por 5 Campos por picadura. En Sal y manitol por medio de la técnica de estría cruzada en 3 Campos. En Agar Chocolate por medio de la técnica de estría cruzada en 5 campos.

-Incubar todas las cajas a 37° por espacio de 24 hrs
Tercer Día.
-Observar Colonias
-Identificar las colonias patógenas (alfa o Beta Hemolíticas), Identificación de colonias patógenas en agar sal y manitol y resembrar en el tubo con 0.5 ml de solución salina. De la colonia más representativa.
-Tinción Gram de la colonia seleccionada, previamente disuelta en S.S
-Sembrar el caldo nutritivo, el MRVP, con la colonia seleccionada por agitación, TSI por estría simple.






-Sembrar el Antibiograma en el medio Muller Hinton con el hisopo dejar reposar 5 minutos y después colocar el sensidisco de acuerdo al resultado de la tinción gran (+).

-Incubar 24 hrs a 37°C
Cuarto Día
-Lectura del antibiograma. Medir los mm de los halos de inhibición de cada uno de los antibióticos
-Lectura e interpretación de pruebas bioquímicas

-Coagulasa: colocar 0.5 ml de plasma fresco al tubo con caldo nutritivo, incubarlo por espacio de 30 min hasta completar 4 hrs
-Catalasa: Obtener una colonia del medio TSI y colocarla en un portaobjetos, agregar H2O2 Observar presencia de Burbujas.







-Oxidasa .Colocar una colonia del medio TSI y colocarla en un papel filtro , añadir reactivo Kovacs y observar coloración naranja
-VP: Agregar 0.5 ml de Hidróxido de sodio dejar reposar 20 minutos si aparee color Rojo es positiva
-TSI: Observar cambio de coloración en la base del tubo Glucosa.

*Anotar Resultados





  

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